人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA試劑盒實驗原理
英文名稱:Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab ELISA
1. 采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit水平。
2. 首先用純化的人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit,再與HRP標(biāo)記的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit呈正相關(guān)。
5. zui后用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準曲線計算出樣品中粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit濃度
。
目的:測定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本中粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISAKit的水平。
6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4 Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標(biāo)準規(guī)格酶標(biāo)儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
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